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利用生物素-親合素系統(tǒng)的特征,可將蛋白質(zhì)進(jìn)行生物素化(即將蛋白質(zhì)標(biāo)記上生物素),與親和素特異性結(jié)合,實(shí)現(xiàn)抗原抗體識(shí)別檢測(cè)、生物大分子捕獲、蛋白相互作用檢測(cè)等目的。
通??煞譃榛瘜W(xué)生物素化和Avitag-生物素化。
蛋白質(zhì)生物素化的方法:
(1)將重組蛋白純化后通過(guò)化學(xué)生物素標(biāo)記法得到生物素化蛋白,通常利用生物素的羧基加以化學(xué)修飾可制成各種活性基團(tuán)的衍生物,然后與重組蛋白質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。
此種方法反應(yīng)條件較為劇烈,一些相對(duì)敏感的蛋白容易失活,另外由于活化的生物素不具有識(shí)別特定蛋白質(zhì)的能力,因而化學(xué)方法生物素化是非特異的。
(2)通過(guò)Avitag與重組蛋白融合表達(dá),在體外把生物素標(biāo)簽進(jìn)行生物素化,從而實(shí)現(xiàn)重組蛋白的生物素化。 這種特異性的定點(diǎn)修飾,對(duì)蛋白的活性影響小,產(chǎn)物專(zhuān)一,但是此種方法必須把目的蛋白與生物素標(biāo)簽進(jìn)行融合表達(dá),然后進(jìn)行純化得到高純度的重組蛋白。
產(chǎn)品內(nèi)容
項(xiàng)目 | 周期(工作日) |
---|---|
化學(xué)生物素化-重組蛋白制備與檢測(cè) | 7 |
Avitag生物素化-重組蛋白制備與檢測(cè) | 5 |
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