科研服務(wù)

通用生物提供噬菌體文庫構(gòu)建與抗體篩選服務(wù),可涵蓋多種文庫類型,能為客戶提供基于自有噬菌體抗體文庫平臺技術(shù)制備的多物種單克隆抗體制備服務(wù)??筛鶕?jù)客戶的需求提供定制服務(wù),并提供靈活有效的篩選服務(wù)。

圖1 噬菌體展示文庫淘選流程

產(chǎn)品詳情

步驟 服務(wù)描述 服務(wù)周期
1 免疫 抗原檢測 SDS-PAGE或其它方法檢測抗原質(zhì)量 6-8周
動物免疫(二選一) 5只BalB/C小鼠,3-4次免疫
2只新西蘭大白兔,3-4次免疫
2 Fab/ScFv文庫構(gòu)建 cDNA 合成 免疫細胞收集,總RNA提取,反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。 1周
質(zhì)粒構(gòu)建 以上述cDNA為模板, PCR擴增抗體基因片段,并連接至載體。 4周
轉(zhuǎn)化 將已構(gòu)建好的載體電轉(zhuǎn)化至大腸桿菌菌株。 2周
庫容鑒定 (1)以上轉(zhuǎn)化菌株復(fù)蘇后,梯度稀釋,并涂布平板,計算陽性克隆數(shù);
(2)挑選10個陽性單克隆,提取質(zhì)粒后,進行酶切驗證;
(3)通過陽性克隆數(shù)和酶切驗證的結(jié)果,計算抗體庫庫容。
保證5 x108 clones/library
抗體庫生產(chǎn) 通過輔助噬菌粒拯救獲得噬菌體展示抗體庫。 1周
運輸(可選) 低溫(干冰)運輸。 N/A
3 抗體篩選 抗原檢測 SDS-PAGE或其它方法檢測抗原質(zhì)量。 3-4周
抗體篩選 4輪淘洗,抗體親和力超過 10-7。
結(jié)合噬菌體的檢測(大約40個單克?。? 噬菌體擴增(¥240/克?。? 2周
ELISA檢測(¥120/克隆)
噬菌體DNA提?。ǎ?20/克隆)
噬菌體DNA測序(¥120/克?。?
抗體檢測(5-10個單克?。? 從以上已測序的結(jié)合噬菌體中,挑取5-10株不同序列的噬菌體進行抗體的可溶性表達,并進行ELISA鑒定。 2周
交付 實驗報告(測序結(jié)果等);抗體基因片段的cDNA。 N/A
4 增值服務(wù) 動物加免 增加動物免疫只數(shù) N/A
抗體表達 全抗體Expi293/CHO瞬時表達 2-4周
親和力測定/排序/表位競爭 運用Biacore T200進行抗體親和力測定,排序或表位競爭實驗 請詢價

服務(wù)優(yōu)勢

  • 快速篩選得到優(yōu)質(zhì)的單克隆抗體
  • 高效、高親和力
  • 專業(yè)的操作以及嚴格的質(zhì)量管理
  • 自主基因合成及測序平臺

交付標準

  • 鼠源或兔源scFv / Fab文庫
  • 實驗報告(測序結(jié)果等)
  • 抗體基因片段的cDNA

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