試劑產(chǎn)品

產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品是2×Mix預(yù)混合試劑，染料法進(jìn)行 qPCR 的專用試劑，能夠?qū)崿F(xiàn)在單個(gè)反應(yīng)孔中進(jìn)行熒光定量PCR反應(yīng)。本產(chǎn)品含有熱啟動(dòng)Taq酶、SYBR Green I、dNTPs、Mg2+等，本產(chǎn)品對(duì)反應(yīng)緩沖體系進(jìn)行了深度優(yōu)化，能夠提高反應(yīng)的擴(kuò)增效率， 促進(jìn)低濃度模板的有效擴(kuò)增，可以進(jìn)行高靈敏度的 PCR 反應(yīng)。本產(chǎn)品針對(duì)不同品牌型號(hào)的熒光定量PCR 儀，分別提供不同濃度的Rox 參比液（High Rox/Low Rox），用于校正孔與孔之間的熒光信號(hào)誤差。

反應(yīng)體系

組分 體積（ul） 終濃度
GUeasy Taq SYBR Green qPCR Master Mix 10 1×
Forward Primer（10uM） N 0.1-0.5uM
Reverse Primer（10uM） N 0.1-0.5uM
50×High or Low Rox 0.4 1×
Template 1-5 -
ddH2O up to 20ul -

參考程序

循環(huán)步驟 溫度 時(shí)間 循環(huán)數(shù)
預(yù)變性 95℃ 1-2min 1
變性 95℃ 5-15s 40
退火/延伸 60℃ 30s
溶解曲線階段 根據(jù)儀器默認(rèn)程序設(shè)置 1

適用機(jī)型

High Rox 適用機(jī)型： ABI 5700, 7000, 7300, 7700,7900HT ,7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus.

Low Rox 適用機(jī)型：  ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 1Plus/3/5/6 Flex/7 Flex/12k Flex;
Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000.

不需要Rox 校正的儀器型號(hào)：
Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied ScienceLightCycler 2.0; Lightcycler 96 ,LightCycler 480;
Thermo Scientific PikoReal Cycler;
Cepheid SmartCycler;
Illumina Eco QPC;
Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4.

注意事項(xiàng)

  • 擴(kuò)增曲線：標(biāo)準(zhǔn)的擴(kuò)增曲線為S 型。

    • 1)   Ct 值在20-30 之間時(shí)，定量會(huì)分析比較準(zhǔn)確，超出范圍可對(duì)模板進(jìn)行調(diào)整；

    2)   Ct 值在35以上 時(shí)，檢測(cè)結(jié)果無法定量分析基因的表達(dá)量，但可用于定性分析。

  • 熔解曲線：

    • 熔解曲線為單峰，說明反應(yīng)特異性好可以進(jìn)行定量結(jié)果分析；如果熔解曲線出現(xiàn)雙峰、多峰，則不能進(jìn)行定量分析。熔解曲線為雙峰，需要通過瓊脂糖凝膠電泳判斷非目標(biāo)峰是引物二聚體還是非特異性擴(kuò)增， 如果是引物二聚體，需要降低引物濃度，或者重新設(shè)計(jì)擴(kuò)增效率較高的引物。如果是非特異性擴(kuò)增，則需要提高退火溫度，或者重新設(shè)計(jì)高特異性的引物。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 單位 目錄價(jià)格(RMB)
KQRM1-1 GUeasy Taq SYBR Green qPCR Master Mix 1ml 支 200
KQRM1-3 GUeasy Taq SYBR Green qPCR Master Mix 3ml 支 500
KQRM1-5 GUeasy Taq SYBR Green qPCR Master Mix 5ml 支 800

訂購(gòu)信息

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