科研服務(wù)

基因文庫特指生物來源的、人工合成的或克隆技術(shù)等所得到的一個重組分子群。在體外使基因發(fā)生大量變異，并從中定向選擇出所需的突變體的過程?；蛲蛔兾膸焓腔蚝铣?、基因突變和定向進(jìn)化研究相結(jié)合的產(chǎn)物。

通用生物可以根據(jù)您的需求，協(xié)助設(shè)計合成并構(gòu)建各種基因文庫。交付的文庫可以質(zhì)粒文庫，也可以是線性雙鏈DNA文庫。

文庫類型

  • 定點飽和突變文庫
    • 使任何一個或者多個氨基酸位點都可以被其它19種常見的氨基酸所替代
    • NNK文庫，簡并文庫中的一種
    • 可快速、高效地探究蛋白功能、活性中心及特殊活性構(gòu)型等
  • 掃描文庫
    • 點飽和掃描NNK
    • 特定氨基酸掃描 (丙氨酸、組氨酸等)
    • 通過用丙氨酸逐一取代每一個位置或關(guān)鍵位置的氨基酸，發(fā)現(xiàn)對蛋白功能、相互作用及形態(tài)具有重要功能的氨基酸殘基
  • 隨機(jī)突變文庫
    • 利用可控的易錯PCR技術(shù)
    • 可以在一個定義的小區(qū)域創(chuàng)建隨機(jī)氨基酸替換
    • 突變頻率可以設(shè)置為1~20個突變/kb的范圍內(nèi)的任意一個值
  • Trimer 文庫
    • Trimer 引物合成
    • 相較于 NNK，只含有20種密碼子
    • 更精準(zhǔn)、針對復(fù)雜文庫性價比更高
  • Trimer組合突變文庫
    • 通過對目標(biāo)蛋白的核酸編碼序列進(jìn)行設(shè)計，將目標(biāo)區(qū)域的多個氨基酸位點同時突變成多種氨基酸，從而產(chǎn)生不同的突變組合，以此對應(yīng)的不同突變類型的核酸序列形成的文庫。目前，被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)工程、抗體篩選、藥物發(fā)現(xiàn)、酶工程等研究領(lǐng)域

服務(wù)優(yōu)勢

  • 超高的突變精確性、更豐富的文庫多樣性
  • 更大的文庫容量、更高的篩選成功率

服務(wù)流程

意向確認(rèn)

1

文庫設(shè)計

2

訂單確認(rèn)

3

文庫合成

4

質(zhì)檢

5

發(fā)貨

6

交付標(biāo)準(zhǔn)

  • 線性DNA文庫：1-2 μg凍干粉
  • 質(zhì)粒DNA文庫：5-10 μg凍干粉
  • 發(fā)貨文件：測序結(jié)果比對圖、文庫電泳圖、酶切圖

文庫的應(yīng)用

  • 蛋白質(zhì)工程：掃描、定點或隨機(jī)突變庫，可允許您測試一個蛋白質(zhì)內(nèi)數(shù)個特異位點上的有利替換，以增強(qiáng)蛋白質(zhì)性能，例如：蛋白-蛋白互作、溶解度、穩(wěn)定性、折疊及催化活性。
  • 抗體工程：定點飽和或氨基酸定制文庫，可允許在抗體高變位置內(nèi)跨一個區(qū)域或多個區(qū)域引入多樣化位點，從而篩選有利的抗體特性。
  • 定向進(jìn)化：隨機(jī)庫可允許通過篩選大型群體來測試預(yù)期形狀，從而改良結(jié)構(gòu)特性或功能特性。
  • 基因表達(dá)：組合庫可允許通過改變載體中的調(diào)控元件組合，從而優(yōu)化蛋白質(zhì)的表達(dá)性能（如：表達(dá)量、可溶性、活性及穩(wěn)定性等）。
  • 基因敲除：利用CRISPR/Cas9技術(shù)建立基因組突變文庫或與某類功能相關(guān)的基因突變體庫，sgRNA文庫，通過功能性篩選及富集，及后續(xù)的PCR擴(kuò)增及深度測序分析，發(fā)掘與篩選與表型相關(guān)的基因。
  • 合成和結(jié)構(gòu)生物學(xué)：丙氨酸和截斷庫用于高通量蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究中，此類研究涉及：功能、穩(wěn)定性、溶解度、催化活性、折疊和結(jié)構(gòu)域-結(jié)構(gòu)域相互作用。

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